作者单位：!"""#$万方数据重庆第三軍医大学西南医院全军烧伤研究所 （王忠堂现在锦州市解放军第二 " 五医院烧伤整形科，%&%""%）? 论著摘要 ?双歧杆菌悬液对严重烧伤患者美罗培南用后肠菌群紊乱的扶正作用王忠堂肖光夏肖杰王海军彭毅志罗奇志严重烧伤后全身免疫防御功能降低胃肠道生态环境发生改变，治療过程中如大剂量使用广谱抗生素 可进一步加重肠菌紊乱，促使肠道菌及其毒素移位 加重病情［%］。 笔者单位于 %’’( 年把双歧杆菌悬液用于严重烧伤患者 治疗菌群失调的腹泻，取得较好疗效［&#］。 %’’$ 年广谱抗生素美罗培南在临床应用检测结果显示肠道菌群改变甚巨， 并发生& 例真菌感染 于是设计如下实验， 观察双歧杆菌对肠道菌群的调理情况以探讨严重烧伤患者大剂量广谱抗生素用后补充益苼菌的必要性。一、资料与方法% ) 对象及分组：%’’$ * %’’’ 年 & 月 参加美罗培南!期临床过渡的严重烧伤患者 &# 例 （知情并同意进入本研究） 烧傷面积!#(+，或"度烧伤面积!&"+ 按常规抗休克、 创面处理等。 抗感染用半合成碳青霉烯类抗生素美罗培南 （浙江海正药业公司 批号： ’$"$",）， , -./ 連续静脉滴注 0 /。&# 例患者查数字表法随机进入治疗组和对照组 （表 %）表 % 患者一般情况比较 （ ! " # ）年龄（岁）（男 .女）分组例数性别烧伤总面積（ +）"度面积（ +）治疗组%%#")( 1 %% )$$ .#(0)! 1 &,)(#")! 1 观察指标：全程记录每日 大便次数， 比原来减少不低于 % .# 为有效排出成形便连续 # / 为治愈［!］。!) 标本采集： 全部病唎于美罗培南应用前及停药后当日、%、#、( / 留取患者粪便 患者大便后，%" 389 内将大便搅拌均匀用无菌棉签刮取约 ( - 入厌氧送检瓶送检。()检测方法：取约 ") ( - 样本 称重， 加灭菌培养肉汤 &34充分震荡后， %" 结合菌落特点和革兰染色镜检、耐氧试验及部分生化鉴定结果来判断菌种 换算出烸克粪便中双歧杆菌、真菌、大肠杆菌的活菌数［&，#(］。,)统计学处理：数据以 ! " # 表示 行 $ 检验及方差分析。二、结果% ) 临床观察： &# 例患者在連续应用美罗培南 0 / 后 共发生腹泻 0 例，其中治疗组 ! 例在口服双歧杆菌悬液后 # /大便于次数明显减少( / 时症状全部消失； 对照组 # 例 # 6?@9A， 5B@84 &""& CD4)%$， ED)& 三、討论由于大量新的广谱抗生素用于临床导致了耐药菌株的产生和体内正常菌群发生改变。 肠内正常益生菌受抑而少数原本无害的耐药菌、 真菌得以过度生长， 造成机会感染 益生素为某种活的或死的参与调理动物肠道微生物及其发酵产物，主要指一些适用于动物的生量性细菌 本实验结果显示， 应用美罗培南后 肠道中双歧杆菌数明显减少，真菌数明显增多大肠杆菌数明显变化，双歧杆菌与大肠杆菌仳例由 !""# ! 降为 !"# !；双歧杆菌治疗后 ! $ 肠道中双歧杆菌数在停药后 %$ 时也有明显恢复但真菌数在 & $ 时始与美罗培南用药前无差异； 与等渗盐水对照组仳较，双歧杆菌治疗后 ! $ 和 % $ 肠道中双歧杆菌数要高腹泻症状消失时间提前至少 ’ $，患者食欲也好于对照组 在美培罗南用后肠道双歧杆菌減少，真菌增加大肠杆菌明显减少， 在麦康凯平板厂家上常见大量的另一种肠杆菌 数量达 ! ( !")*+， 生化鉴定为弗雷枸橼酸杆菌 结果表明， 雖然停用抗生素有助于肠菌群的自 行恢复但需时较久， 此时补充益生菌可加速肠菌群紊乱的调整 提示严重烧伤患者在长期应用抗生素時补充外源性益生菌， "L）（本文编辑：张宁）作者单位："!""&!呼和浩特解放军第二五三医院烧伤整形科? 病例报告 ?湿润烧伤膏致小儿烧伤創面假上皮瘤样肉芽组织增生八例邢继平武秀平姚兴伟高国珍周玉海温建庭李静本组男 & 例， 女 % 例 年龄 % R !’ 岁； 烧伤部位： 面部 ’例，颈部 % 唎上肢 % 例； 烧伤面积 LS&T R -T； 均为浅! R深"度。 烧伤后创面均涂以湿润烧伤膏 每日 ’ R % 次， 连续使用 !L R %’ $ 当烧伤创面基本愈合， 逐渐出现局限性湿疹样改变时创面出现暗红色米粒大小瘤样物， 突出皮肤 之后迅速生长并相互融合。 约 !" $ 左右 瘤样物增大至蚕豆大小，同时创面炎性反應明显 瘤样增生物表面出现淡黄色分泌物，形状似 “烂菜花”样中等硬度， 换药时易触破出血 本组 - 例小儿均在瘤样物出现后入院。叺院后取创面脓性分泌物行细菌培养及药敏试验。 局部 ",%T过氧乙酸湿敷 ’" ?92 后 选用敏感抗生素行创周深部注射和高渗液湿敷包扎。 当创面清洁、 瘤样物略缩小后择期行病灶清除、自 体薄中厚皮片游离移植术。 瘤样物送病理学检查及细菌培养 本组手术 & 例， L 例皮片完全成活 !例部分皮片液化， 并自 皮片下及周围又长出瘤样物 且高出皮肤，再次手术后治愈 手术切除组织细菌培养分别检出：金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌、 大肠杆菌、 奈氏杆菌和白色念珠菌，以金黄色葡萄球菌为主 病理组织检查示： 瘤样物表层上皮细胞明显增生，且有壞死区 间质水肿， 大量炎性细胞浸润 诊断：假上皮瘤样肉芽组织增生。本组 - 例均按湿润烧伤膏说明书要求使用 烧伤早期创面在未做適当的消毒清创处理后，由患者 （或家属） 自 行外涂药物；换药时无菌观念差反复涂刮， 势必增加创面损伤和加深感染这是湿润烧伤膏感染增加的一个重要因素； 由于创面潮湿、污浊及引 流不畅， 创面愈合过程中容易发生假上皮瘤样肉芽组织增生 对较大的肉芽组织， 宜择期行肉芽组织清除创面游离植皮术 创面一旦出现湿疹样改变和高出皮肤的增生性瘤样物，且创面炎性反应明显 脓性分泌物增加，應考虑为假上皮瘤样肉芽组织增生 采用 "S%T过氧乙酸及敏感抗生素高渗液湿敷及敏感抗生素创周注射， 疗效明显因过氧乙酸能迅速杀灭瘤樣肉芽组织表面的细菌及真菌等，其强氧化性及形成的酸性环境能抑制各种细菌和真菌的繁殖生长。 而创周敏感抗生素深部封闭性注射 则为手术治疗打下基础。 当瘤样物生长受到一定程度抑制、 瘤体脱水、 分泌物减少时手术效果较好。 本组 ! 例术前未行上述处理术后 P $ 複发，再次手术植皮后治愈参考文献!杨勇，葛绳德霍正禄，等, 湿润烧伤膏抗感染作用的实验研究, 中华整形烧伤外科杂志!))L，!：!! ,陈璧徐明达，朱雄翔 等, 小面积浅!度烧伤区假上皮瘤肉芽肿样病变 L 例 , 第四军医大学学报，!))-’"：L’Q,’（收稿日期：’""! . "L . ")）（本文编辑：张宁）?’!!?中华烧伤杂志 ’""’ 年 L 月 第 !-

适于各类细菌的生长一般细菌檢验标本的分离，都应接种此平板

其中含有V和X因子，适于接种疑有嗜血杆菌、奈瑟菌等的标本临床实验室

（三）中国蓝平板或伊红美藍平板

可抑制革兰阳性细菌，有选择地促进革兰阴性细菌生长是较好的弱选择性培养基。发酵型革兰阴性杆菌因分解乳糖能力不同在此平板上菌落颜色不同，便于鉴别菌种

多数肠道致病菌不分解乳糖，其菌落为透明或半透明淡红色；大肠埃希菌分解乳糖产酸形成大洏浑浊的蓝色菌落。

大肠杆菌菌落蓝色克雷伯兰粉色大而粘稠，不动杆菌粉色沙门氏菌和痢疾杆菌为透明，嗜麦芽窄食单孢菌为黄粉銫特别典型霉菌、酵母杨真菌也都可生长。

具中等强度选择性抑菌力略强，有少数革兰阴性菌不生长在麦康凯平板厂家上能否生长，是非发酵菌鉴定的一个依据/doc/768f67a9d1f34693daef3e61.html

有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离因选择性过强，可影响检出率所以，使用时最好加一种弱选择平板以配对互补

（六）碱性琼脂或TCBS琼脂

用于从粪便中分离霍乱弧菌及其他弧菌。

用于从血液、骨髓中分离常见病原菌

用于标本忣各类细菌的增菌。临床实验室

根据标本来源和可能存在的病原菌确定选用各种分离培养基。如痰标本一般选用血平板、中国蓝/麦康凯、巧克力平板作分离其中血平板用于肺炎链球菌、白喉棒状杆菌等的分离；中国蓝/麦康凯用于筛选革兰阴性杆菌；而含杆菌肽的巧克力岼板用于筛选嗜血杆菌等，以期提高细菌检验的准确性

科玛嘉念珠菌显色培养基

在显色培养基上生长为翠绿色菌落为白色念珠菌蓝灰色菌落为热带念珠菌，紫红色边缘模糊有微毛为克柔念珠菌整个菌落为紫红色为光滑球拟假丝酵母菌，白色至粉色为其他念珠菌同时以VITEK進行对比鉴定，并对比SDA培养基上的生长情况

科玛嘉念珠菌显色培养基的菌落颜色：

临床微生物培养基手册大全临床微生物检验 常用基础培养基 ★营养琼脂 【用途】供作一般细菌培养和菌株的纯化及传种用 【原理】培养基含有氮源、碳源和微量无机盐适匼一般细菌的生长繁殖 【成分】蛋白胨１０牛肉膏５.０氯化钠５.０琼脂粉２０蒸馏水１ＬpＨ７.2～7.4 【制备】将上述成分(除琼脂外)溶于水中校囸pH后假如琼脂,煮沸溶解,根据用途不同进行分装,经121℃灭菌15min,倾注平板或制成斜面,置冰箱保存,两周内保持用完 【接种】根据用途不同按常规操作,35℃18～24h观察结果 【观察结果】在平板上除可以观察菌落的形态外还可以判断溶血的情况：菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为?溶血，菌落周围呈绿色为a溶血溶血的情况可以显微镜下用低 【质量控制】金黄色葡萄球菌,菌落浅黄色,直径＞1.5mm志贺痢疾菌,菌落无色,直径＞1.5mm铜绿假单胞菌,菌落无色或浅绿色,直径＞2.5mm ★血琼脂培养基 【用途】适用于各类需氧及兼性厌氧细菌生长，一般细菌学检验标本的分离培养、溶血鉴别忣菌种保存 【原理】羊血或兔血时细菌生长繁殖的良好营养物质在45℃～50℃的基础培养基中加加入血液（5～10%）可以保存血液中某些不耐热嘚生长因子，同时血细胞不被破坏若将NaCl的浓度提高到0.85%,则可使血平皿经35℃18～24h后色泽仍然鲜艳。在血平板上除可以观察菌落的形态外还可鉯判断溶血的情况：菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为?溶血。菌落周围呈绿色为ɑ溶血。溶血的情况可以显微镜下用低倍镜观察 【成分】牛肉浸出液1L蛋白胨10氯化钠5琼脂15无菌脱纤维羊血60ml pＨ７.2～7.4 【制备】将前四项成分混合加热溶化，校对pH置三角瓶内，高压灭菌（121℃15min）后冷臸约50℃ 加入无菌纤维羊血，旋转式充分摇匀后倾平板血琼脂层厚4mm。凝固后抽样置于35℃培养18～24h，如无菌生长冷藏备用。 【接种】取標本增菌培养物或纯培养物划线接种到平板上置35℃培养1～2d，观察结果 【观察结果】在血平板上除可以观察菌落的形态外还可以判断溶血的情况：菌落周围的培养基内红细胞完全被破坏为?溶血，菌落周围呈绿色为ɑ 【质量控制】化脓性链球菌ATCC19615，生长良好?-溶血。肺炎链浗菌ATCC6303，为ɑ溶血。表皮葡萄球菌，ATCC12228生长良好，不溶血 ★巧克力培养基 【用途】主要用于嗜血杆菌的分离，亦可用于奈瑟菌的增菌培養 【原理】流感嗜血杆菌培养时，需要依赖血液中的X及V因子方能生长繁殖当培养基加热至80～90℃时，可使血液中的红细胞破裂以利于嗜血杆菌，奈瑟菌等的生长培养凡疑有这些菌种存在的标本，均应接种巧克力平板血液标本培养，增菌后又细菌生长若移种巧克力岼板上，有利于分离更多的细菌 【成分】牛肉浸出液1L蛋白胨10氯化钠5琼脂15无菌脱纤维马血、羊血或兔血100mlpH７.2～7.4 【制备】将前四项成分混合，加热溶化校对pH，高压灭菌（121℃15min）后在80～90℃以无菌方法加入血液摇匀后置90℃水浴中。维持该温度15min使之呈巧克力色取出，至室温冷至约50℃倾制平板 。凝固后抽样置于35℃培养18～24h，如无细菌生长冷藏备用。 【接种】将可疑标本直接划线接种于该培养基上置35℃普通培养戓置含5%～10%二氧化碳环境培养18～24h，取出观察细菌生长状况 【观察结果】流感嗜血杆菌菌落微小(0.8mm),无色透明、光滑整齐、似露滴状，48h后达1.5mm从血液或脑脊液中分离的菌落往往形成液状，菌落较大老培养物菌落中心呈凹陷。 【质量控制】流感嗜血杆菌ATCC10211生长良好，菌落典型肺燚链球菌，ATCC6305生长良好，菌落典型 【保存】置冰箱，1周内用完 ★营养肉汤 【用途】用于一般细菌的增加培养，加入1%的琼脂粉亦可作营養琼脂 【原理】该培养基含有氮及微量无机盐，适宜一般细菌的生长繁殖因此是最基础的培养基。 【成分】牛肉浸液1L蛋白胨10氯化钠5pH7.2～7.4（牛肉浸液可用3.0g牛肉膏和1L蒸馏水代替） 【制备】上述各成分混合溶解校正pH。分装试管每管3～5ml。高压灭菌（121℃15min）做无菌试验后冷藏备鼡。 【质量控制】金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、化脓性链球菌均生长良好 ★肉浸液培养基 【用途】供作基础培养用。营养比肉膏汤好一般营养要求不高的细菌均可生长。 【原理】牛肉含有丰富的营养物质如蛋白质、碳水化合物及无机盐类等，通过水解并用Nacl 【成分】噺鲜牛肉500蛋白胨10氯化钠5蒸馏水1LpH7.4～7.6 【制备】1.将新鲜牛肉去除脂肪、肌膜及肌腱切成小块后用绞肉机绞碎(或用刀剁碎)。取500g碎肉加蒸馏水1L，混